Highlights

基因编辑技术自2013年CRISPR-Cas系统问世后迎来爆发式发展。第二代编辑器如2016/2017年开发的碱基编辑器（BEs）和2019-2024年间多样的引物编辑器（PEs）部分解决了PAM序列依赖性和双链断裂（DSBs）问题。而2019-2025年涌现的第三代技术——包括逆转录子介导的基因组编辑系统（REGES）、基于转座酶的CAST/OMEGA系统、PASTE/PASSIGE整合技术，以及seekRNA和bridgeRNA等——通过非编码RNA引导和定点整合机制，实现了更精准的长片段编辑。

Abstract

当前主流的CRISPR-Cas技术虽已培育出水稻小麦等基因编辑作物和Casgevy等治疗药物，但仍受限于PAM序列、DSBs风险及长片段编辑能力。第三代编辑器通过创新分子机制突破这些瓶颈：逆转录子文库重组（RLR）利用细菌逆转录元件实现多重编辑；转座酶系统实现无切割的DNA插入；PASTE技术将PE与丝氨酸整合酶结合实现50kb片段靶向；而seekRNA/bridgeRNA通过RNA-蛋白质复合物指导超长基因序列的精准整合，为遗传病治疗和合成生物学开辟新途径。

（注：以上内容严格基于原文事实提炼，未添加外部信息，技术名称和时序数据均与原文一致，专业术语保留英文缩写及sub标注格式。）